DNAPolymerase
1. DNA Replication
: DNA topoisomerase, Helicase, Primerase, DNAPolymerase I, DNAPolymerase III, Okazaki fragment …..
2. DNAPolymerase에 대해..
: DNAPolymerase I, T4 DNAPolymerase, E. coli DNAPolymerase III, Eucaryotic DNAPolymerase.
ppt자료라서 본문을 올리기가 힘들군요.
Polymerase chain reaction중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)은 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관내에서 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법으로서, 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA 합성이 가능하므로 분자 생물학적으로 제한효소의 발견만큼 획기적인 것이라고 할 수 있다
DNA를 만들기 위해서는 DNA replication을 거쳐야 하는데 이때 이를
조금더 효율적이게 하기위한 촉매작용을 하는 DNApolymerase라는 효소들이 있고 필요로 한다. 이 DNApolymerase란 일반적으로는 1956년 A.콘버그가 미생물에서 발견했으며, 지금은 생물계 전반에 널리 존재한다는 사실이 알려져 있다. 특히, 세포
◭ Date
◭ Subject
1. PCR(Polymerase Chain Reaction): DNA를 복제•증폭시키는 분자생물학적인 기술.
2. PCR이 끝나면 전기영동(agarose gel electrophoresis)을 실시하여 반응산물을 확인한다.
◭ Purpose
PCR은 사람의 genome과 같이 매우 복잡하고, 지극히 미량인 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정 DNA 단편만
Ⅰ. DNA복제의 정의
DNA는 세포가 분열하기 전에 복제되어 그 양이 두 배로 늘어나게 된다. DNA의 복제는 원래의 사슬과 상보적인 결합에 의해 새로운 사슬이 만들어지는 반보존적인 복제를 한다.
세포분열의 간기 중 S기 에서 DNA가 복제된다. 따라서 세포분열의 결과 생긴 딸세포가 모세포와 똑같은 양
◈ Observation & Result
Ligased plasmid + 만든 CP Cell
Ligation + 상용 CP cell
Inserted plasmid + 상용 CP Cell
Plasmid only + 상용 CP cell
실험5 Subject Transformant 확인/ LB Broth에 (containing 100μg/ml of ampicillin) transformant를 multiplication
◈ Purpose
전날 만든 transformant가 제대로 배양되었는지 colony를 확인하고, ampicillin을 처리해
1. DNA를 자른다는 것은 nucleotide를 연결하고 있는 phosphodiester bond를 끊어여러 DNA 단편을 만들어 내는 것을 의미한다. 이 때, 이런 역할을 하는 효소를nuclease라고 하며 그 종류로는 바깥 쪽을 절단하는 효소인 exonuclease와 안쪽을 절단하는 endonuclease가 있다.
2. 대표적 endonuclease인 제한효소(restriction enzyme)는
[1] 불연속 DNA 복제방법 2중 DNA는 항시 정해진 방향으로 진행되면서 두 가닥이 동시에 복제된다. 복제가 시작될 때 복제분지점이 한 방향으로의 이동에는 문제점이 있는데 그 이유는 2중 나선형이 서로 반대방향으로 이루어졌기 때문이다. 또한 DNA중합효소는 DNA합성시 5'에서 3'방향으로 합성해 나가는데
2. 제한효소(restriction enzyme)에 의한 유전자의 분리
유전자 클로닝은 DNA분자를 아주 정확하고 반복적으로 절단할 것을 요구한다. 각 Vector 분자의 circle을 열어서 새로운 DNA가 삽입될 수 있도록 각 분자마다 하나의 같은 위치가 절단되어야 한다. DNA를 자른다는 것은 nucleotides를 연결하고 있는 phosphodiester b
Subject : DNA sub-cloning을 위해 원하는 유전자를 분리한다.
Purpose: DNA sub-cloning에 사용할 원하는 유전자를 만들기 위해 plasmid(vector)내에 restriction enzyme을 사용하여 DNA를 자르고 원하는 유전자를 삽입한 후, 목적하는 유전자가 정확하게 cloning되었는지 DNA 전기영동 결과를 분석하여 확인할 수 있